小鼠γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒檢測原理

產品名稱：小鼠γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒

規格：96T

儲存條件：2-8℃

有效期：6個月

用途：用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中小鼠γ干擾素（IFN-γ）的含量。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠γ干擾素（IFN-γ）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠γ干擾素（IFN-γ）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒性能：

1. 檢測范圍：25 pg/mL – 800 pg/mL。

2. 靈敏度：最-低檢測濃度小于 1.0 pg/mL。

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.  重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15%

樣品收集、處理及保存方法：

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3.  細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

4.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

注：標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。